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BCA法，即碧云生成物化学法，是一种常用于测定蛋白质浓度的实验室技巧。其基本道理是经由过程蛋白质与BCA试剂中的铜离子在碱性情况下构成牢固的紫色络合物，该络合物的吸光度与蛋白质浓度成正比，从而实现蛋白质浓度的正确测定。 具体操纵步调如下：
- 筹备标准蛋白质溶液跟待测样品，将它们分辨浓缩至合适的浓度范畴。
- 向每个样品中参加等量的BCA任务液，充分混匀后，置于37℃温育30分钟。
- 利用分光光度计，在540-595nm的波长范畴内测定样品的吸光度。
- 根据标准蛋白质溶液的吸光度，制造标准曲线。
- 经由过程标准曲线，打算待测样品的蛋白质浓度。
- 对成果停止统计分析，确保实验数据的正确性。 BCA法的长处是操纵轻便、灵敏度高、反复性好，实用于差别范例的蛋白质样品。其余，该法的线性范畴宽，可能满意多种浓度蛋白质的测定须要。 须要留神的是，BCA法在测定过程中可能会遭到样品中某些因素的烦扰，如复原剂、金属离子等，因此在操纵前应对样品停止恰当处理，以增加烦扰要素。 总之，BCA法是一种坚固且有效的蛋白质浓度测定方法，广泛利用于生物化学跟分子生物学范畴。