怎么利用吸光度算多糖提取率

发布时间:2024-11-28 07:45:20

怎样利用吸光度算多糖提取率?起首做一个葡萄糖标准曲线,把回归方程用excel做出来,网上百度有做回归方程的步调,将你测出来的多糖吸光度代入回归方程,留神吸光度是y值,求出x值就是你想要的多糖含量,必定不要把单位搞混,做后再换算成你所用喷鼻菇总量中的含糖量。多糖提取实验计划流程食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法跟酶提法等,其中酶提法是利用酶对细胞构造的破坏感化,使存在于细胞外部的多糖开释出来,从而进步了多糖的得率。本次实验采取纤维素酶跟果胶酶对紫蘑菇停止水解,研究喷鼻菇多糖的最佳提取工艺,并探究蘑菇粒度、蘑菇消融方法以及酶法提取中多糖提取后果的评价方法。可能同步做三组对比实验:⑴采取水提,不加酶;⑵采取酶法提取;⑶采取酶空白(只加酶,不加蘑菇粉)。因为酶中也含有大年夜批的糖类成行厅伏分,其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。因此,在打算酶法提取多糖的后果时,要减去酶本身所引入的糖。在断定最佳酶浓度时更要考虑。一、实验流程:蘑伏贺菇枯燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→参加纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率式中: n一提取液浓缩倍数;C一提取液中多糖的浓度(mg/mL);V一提取液体积(mL);m一蘑菇的品质(mg) 。测准时取三个平行样,成果数据为平行样的均匀数值。二、具体实验步调:1、多糖标准曲线的绘制精巧称取105℃枯燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶档携中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精巧汲取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分辨置于50 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精巧汲取上述各种溶液2.0 mL,分辨参加5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,敏捷参加5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置滚水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,并打算其标准曲线回归方程。(1)精巧度实验:精巧汲取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操纵,分辨测定吸光度,求得RSD。(2)重现性及多糖含量测定:精巧称取巴西蘑菇多糖0.1000g,按“供试液的配制”跟“标准曲线的制备”项下操纵,分辨测定吸光度,求得多糖的均匀含量,及RSD值