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BCA法，即碧雲生成物化學法，是一種常用於測定蛋白質濃度的實驗室技巧。其基本道理是經由過程蛋白質與BCA試劑中的銅離子在鹼性情況下構成牢固的紫色絡合物，該絡合物的吸光度與蛋白質濃度成正比，從而實現蛋白質濃度的正確測定。 具體操縱步調如下：
- 籌備標準蛋白質溶液跟待測樣品，將它們分辨濃縮至合適的濃度範疇。
- 向每個樣品中參加等量的BCA任務液，充分混勻後，置於37℃溫育30分鐘。
- 利用分光光度計，在540-595nm的波長範疇內測定樣品的吸光度。
- 根據標準蛋白質溶液的吸光度，製作標準曲線。
- 經由過程標準曲線，打算待測樣品的蛋白質濃度。
- 對成果停止統計分析，確保實驗數據的正確性。 BCA法的長處是操縱輕便、靈敏度高、重複性好，實用於差別範例的蛋白質樣品。其余，該法的線性範疇寬，可能滿意多種濃度蛋白質的測定須要。 須要注意的是，BCA法在測定過程中可能會遭到樣品中某些因素的干擾，如復原劑、金屬離子等，因此在操縱前應對樣品停止恰當處理，以增加干擾要素。 總之，BCA法是一種堅固且有效的蛋白質濃度測定方法，廣泛利用於生物化學跟分子生物學範疇。