怎么利用吸光度算多糖提取率

怎么利用吸光度算多糖提取率？首先做一个葡萄糖标准曲线，把回归方程用excel做出来，网上百度有做回归方程的步骤，将你测出来的多糖吸光度代入回归方程，注意吸光度是y值，求出x值就是你想要的多糖含量，一定不要把单位搞混，做后再换算成你所用香菇总量中的含糖量。多糖提取实验设计流程食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等，其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用，使存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高了多糖的得率。本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解，研究香菇多糖的最佳提取工艺，并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。可以同步做三组对比试验：⑴采用水提，不加酶；⑵采用酶法提取；⑶采用酶空白（只加酶，不加蘑菇粉）。由于酶中也含有少量的糖类成行厅伏分，其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。因此，在计算酶法提取多糖的效果时，要减去酶本身所引入的糖。在确定最佳酶浓度时更要考虑。一、实验流程：蘑伏贺菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率式中： n一提取液稀释倍数；C一提取液中多糖的浓度（mg/mL）；V一提取液体积（mL）；m一蘑菇的质量（mg） 。测定时取三个平行样，结果数据为平行样的平均数值。二、具体实验步骤：1、多糖标准曲线的绘制精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶档携中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并计算其标准曲线回归方程。（1）精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得RSD。（2）重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g，按“供试液的配制”和“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得多糖的平均含量，及RSD值